Sanger法测序的原理是什么Sanger法测序，又称双脱氧链终止法，是由弗雷德里克·桑格（FrederickSanger）于1977年开发的一种DNA测序技术。该技巧是最早实现DNA序列测定的技术其中一个，为后续基因组研究奠定了基础。其核心原理是利用DNA聚合酶在合成经过中对特定引物进行延伸，并通过引入双脱氧核苷酸（ddNTP）来终止不同长度的DNA链，从而获得可区分的DNA片段，最终确定DNA序列。
一、Sanger法测序原理拓展资料
Sanger法测序基于下面内容关键步骤和原理：
1.模板与引物结合：以待测DNA为模板，加入一段已知序列的引物，引物与模板互补配对。
2.DNA聚合酶延伸：在DNA聚合酶的影响下，引物被延伸，合成新的DNA链。
3.双脱氧核苷酸的随机掺入：在反应体系中加入四种正常脱氧核苷酸（dNTP）和一种特定的双脱氧核苷酸（ddNTP）。当ddNTP被随机掺入到新合成的DNA链中时，由于缺乏3′-OH基团，链无法继续延伸，导致链终止。
4.电泳分离：将不同长度的DNA片段通过凝胶电泳进行分离，根据迁移距离判断片段长度。
5.读取序列：通过检测各条带的位置，可以推断出DNA的碱基序列。
二、Sanger法测序原理对比表
| 步骤 | 内容说明 | 原理或影响 |
| 1.模板与引物结合 | 引物与目标DNA模板互补配对 | 确保DNA链的特异性延伸 |
| 2.DNA聚合酶延伸 | 在引物基础上合成新链 | 利用DNA聚合酶催化碱基添加 |
| 3.ddNTP的掺入 | 随机插入导致链终止 | 通过不同的ddNTP控制链长度 |
| 4.电泳分离 | 不同长度的DNA片段迁移速度不同 | 根据迁移距离判断片段大致 |
| 5.序列读取 | 通过条带位置确定碱基顺序 | 从短到长排列，形成序列信息 |
三、Sanger法的优势与局限性
优势：
-准确度高，适合小片段测序；
-技术成熟，操作流程标准化；
-可用于验证其他测序技巧的结局。
局限性：
-测序通量低，不适合大规模基因组测序；
-成本相对较高；
-对长片段测序效率较低。
四、拓展资料
Sanger法测序是一种基于链终止原理的DNA测序技术，通过引入双脱氧核苷酸控制DNA链的延伸长度，并借助电泳技术分离不同长度的片段，从而实现对DNA序列的准确测定。虽然随着高通量测序技术的进步，Sanger法的应用逐渐减少，但它在早期基因组研究中发挥了不可替代的影响，至今仍广泛用于验证和小规模测序任务。
